Page 65 - 《橡塑智造与节能环保》2025年3期
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产业市场
图5 PurH 酶的表达、纯化和验证
动子控制下表达,获得了PurH水解酶。该酶在SDS-
图4 LTX1和 MLTX1的差异表达基因分析
PAGE上呈现单一条带,并在平板上展现出清晰的透明
降解区域,表明其具有降解PU的能力。进一步实验显
解酶具有63.24%的同源性。尽管核苷酸序列相似性适
中,但PurH蛋白展现出明显的结构一致性,揭示了α/β 示,PurH酶能完全水解PU泡沫,导致显著重量损失。
这些结果证实了从LTX1和MLTX1菌株中克隆的PurH
水解酶折叠的存在,表明其在PU降解中可能发挥重要
基因在PU生物降解过程中的关键作用。
作用。
主要结论
通过转录组学分析发现LTX1和MLTX1菌株之间
本文成功分离出高效PU降解菌株Aeromicrobium
存在显著差异基因表达,特别是MLTX1中PurH基因显
sp. LTX1及其突变株MLTX1,两者在降解测试中分别
著上调。GO和KEGG分析揭示了与细胞成分、代谢调
节及RNA生物合成相关的上调途径,可能解释了PurH 使PU泡沫重量损失高达86%。通过SEM、FTIR和TGA
分析证实,这些菌株能分泌特异性酶催化PU泡沫酯键
高表达的原因。KEGG通路中,ABC转运蛋白、氧化
和氨基甲酸酯键的水解。特别的是,PurH酶在降解中
磷酸化和群体感应显著变化,说明MLTX1可能通过感
起关键作用,且在MLTX1中转录表达显著增高。本研
知环境并分泌大量PurH酶到细胞外间隙来增强PU降
究不仅深化了对PU塑料生物降解分子机制的理解,还
解。验证实验证实了主要差异表达基因的可重复性,
为新型生物降解技术开发和PU材料可持续利用提供了
特别是PurH在MLTX1中的高表达,强调了其在提高降
科学基础和潜在生物催化资源。
解效率中的关键作用。
摘编自“MIXUP降塑再造”
通过克隆PurH基因至pET29a(+)载体并在T7启
2025年 第3期 总第567期 33